Quercetin a kurkumín inhibujú tvorbu syncytií
Kvercetín a kurkumín môžu zabrániť a liečiť splynutie buniek, ktoré môže byť príčinou náhlych srdcových úmrtí a neurologických problémov spôsobených spike proteínom.
WALTER M CHESNUT, 28. 4. 2023
Expresia hrotu S a jeho receptora hACE2 indukuje fúziu myších neurónov v kultúre. a) Reprezentatívne obrázky fúzovaných neurónov (prvý riadok) alebo nefúzovaných kontrolných neurónov (ostatné riadky). Dve populácie hipokampálnych neurónov exprimujúcich kombináciu dvoch plazmidov, ako je uvedené vľavo (spike S a GFP, hACE2 a mCherry, prázdny vektor a GFP alebo prázdny vektor a mCherry), boli kultivované spoločne počas 7 dní (7 DIV). Imunocytochémia jadier (modrá), MAP2 (purpurová), GFP (zelená) a mCherry (červená). K fúzii neurónov došlo len vtedy (prvý riadok), keď bola jedna populácia neurónov transfekovaná hrotom S a GFP a druhá hACE2 a mCherry, čo sa vizualizuje prítomnosťou GFP a mCherry v tých istých neurónoch (žltá farba v paneli zlúčenia). b) Kvantifikácia splynutia neurónov ako percento neurónov, ktoré splynuli (žltá farba), keď sú dva neuróny v blízkosti (≤200 μm). c) Reprezentatívne obrázky splynutých neurónov (prvý panel) alebo nesplynutých neurónov (druhý a tretí panel). Dve populácie hipokampálnych neurónov exprimujúcich kombináciu dvoch plazmidov, ako je uvedené nad obrázkami (hrot S a GFP, hACE2 a mCherry, hrot S-2P a GFP alebo hrot S-6P a GFP), boli kultivované spoločne počas 7 dní (7 DIV). Imunocytochémia jadier (modrá), MAP2 (purpurová), GFP (zelená) a mCherry (červená). Fúzia neurónov nastala (prvý panel) len vtedy, keď bol transfekovaný spike proteín S v plnej dĺžke WT, čo je vizualizované prítomnosťou GFP a mCherry v tých istých neurónoch (žltá farba na paneli), a nie vtedy, keď bol použitý niektorý z nefúznych mutantov (spike S-2P, spike S-6P) (druhý a tretí panel). d) Kvantifikácia fúzie neurónov ako percento neurónov, ktoré sa spojili (žltá farba), keď sú dva neuróny v blízkosti (≤200 μm). Údaje v b a d boli zobrazené ako priemer ±SEM, n>200 neurónov analyzovaných v 4–6 nezávislých miskách z 2 disekcií, jednosmerný ANOVA Kruskal-Wallisov test v e) po ktorom nasledoval Dunnov post hoc test porovnávajúci všetky skupiny so skupinou bez spike S alebo hACE2. **p<0,01, ***p<0,001.
Ak ste čítali moje nedávne príspevky, viete, že sa domnievam, že fuzogenita spike proteínu vírusu SARS-CoV-2 môže byť zodpovedná za veľkú časť pozorovaných náhlych srdcových úmrtí a neurologických problémov. Spike proteín totiž spôsobuje fúzie medzi neurónmi a gliovými bunkami.
Mnohé obalené vírusy používajú na vstup do hostiteľských buniek špecializované povrchové molekuly nazývané fuzogény. Počas replikácie vírusov tieto fuzogény zdobia membránu hostiteľských buniek, čo im umožňuje splynúť so susednými bunkami a vytvoriť syncýcie, ktoré vírusy využívajú na šírenie a zároveň sa vyhýbajú imunitnému systému. Mnohé z týchto vírusov, vrátane koronavírusu ťažkého akútneho respiračného syndrómu 2 (SARS-CoV-2), infikujú mozog a môžu spôsobiť závažné neurologické príznaky prostredníctvom mechanizmov, ktoré nie sú dostatočne objasnené. V tejto práci ukazujeme, že expresia buď spike proteínu SARS-CoV-2 (S), alebo proteínu p15 z ortoreovírusu paviánov je dostatočná na vyvolanie fúzie medzi prepojenými neurónmi, ako aj medzi neurónmi a gliovými bunkami. Tento jav sa pozoruje u rôznych druhov, od nematód až po cicavce, vrátane neurónov odvodených z ľudských embryonálnych kmeňových buniek a mozgových organoidov. Ukázali sme, že fúzia prebieha postupne, môže sa vyskytnúť medzi vzdialenými neurónmi a viesť k vytvoreniu viacbunkových syncýtií. Nakoniec sme odhalili, že okrem vnútrobunkových molekúl umožňujú fúzne udalosti difúziu a pohyb veľkých organel, ako sú mitochondrie, medzi splynutými neurónmi.
Na tejto štúdii bolo veľmi zaujímavé, že spike použitý vo vakcínach NEVYVOLÁVA fúziu buniek, pretože je v prefúznej konformácii, čím blokuje svoju fúznu schopnosť. Napriek tomu použili iba hACE2. Takisto furín je schopný rozštiepiť hrot a ten sa viaže na ĎALEKO VIAC ako len na ACE2, myslím si, že to treba ďalej skúmať.
Na rozdiel od p15 bola na iniciovanie bunkovej fúzie potrebná prítomnosť špecifického receptora, keďže expresia samotného hrotu S alebo hACE2 nevytvorila žiadne fúzne udalosti (obr. 3a druhý a tretí riadok a b). Na určenie, či fúzia neurónov bola spôsobená fúzogénnymi vlastnosťami hrotu S, sme použili dve fúzne neaktívne verzie tohto proteínu, hrot S-2P a hrot S-6P (HexaPro, univerzálna spike vakcína).
Spike (S) SARS-CoV-2 a ortoreovírus p15 spôsobujú fúziu neurónov a glií
https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2021.09.01.458544v1.full
Zdá sa, že schopnosť fúzovať bunky nie je obmedzená len na neuróny a gliové bunky. V pľúcach a cievnych stenách pacientov sa našli viacjadrové bunky pripisované spike.
Ďalšou patológiou charakteristickou pre ochorenie COVID-19 bola prítomnosť anomálnych epitelových buniek. Tie sa vyznačovali abnormálne veľkou cytoplazmou a veľmi často prítomnosťou dvoj- alebo viacjadrových buniek. Prítomnosť týchto dysmorfných buniek sa zistila v pľúcach 20 pacientov (50%) vrátane všetkých 6 pacientov, ktorí potrebovali IC, a príležitostne u ďalších 16 pacientov (39%). Tieto bunky boli prítomné v alveolárnych priestoroch alebo vyčnievali do susednej, poškodenej cievnej steny. V niekoľkých prípadoch sa tieto bunky zoskupili a vytvorili oblasti skvamóznej metaplázie.
Perzistencia vírusovej RNA, syncytária pneumocytov a trombóza sú charakteristickými znakmi pokročilej patológie COVID-19
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7677597/
Je potrebné poznamenať, že skvamózna metaplázia predstavuje riziko vzniku rakoviny.
Ako zisťujeme, schopnosť hrotu spájať bunky sa vyskytuje aj v srdci, čo je základom mojich obáv, že fúzia kardiomyocytov je hlavným faktorom množstva náhlych srdcových úmrtí.
Transfekcia hiPSC-CMs s CoV-2 S-mEm vytvorila viacjadrové obrovské bunky (syncytia) vykazujúce zvýšenú bunkovú kapacitu (75±7 pF, n=10 vs. 26±3 pF, n=10; P<0,0001) v súlade so zvýšenou veľkosťou buniek.
Fúzia kardiomyocytov sprostredkovaná hrotovým proteínom SARS-CoV-2 môže prispievať k zvýšenému riziku arytmie u COVID-19
https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0282151
Existuje dostatok dôkazov, ktoré dokazujú, že spike proteín spája bunky, potenciálne v každom orgáne. Preto musíme nájsť spôsob, ako buď liečiť, alebo zabrániť spájaniu buniek, aby sme sa vyhli možným vážnym škodám a poškodeniam.
Na pomoc opäť prichádza kvercetín a kurkumín. Nachádzame ďalší spôsob, ako nám tieto zázračné molekuly dokážu pomôcť v boji proti tomuto nebezpečnému patogénu.
QUERCETIN
Štúdia publikovaná v marci minulého roka ukázala, že kvercetín nielenže znižuje tvorbu syncytií, ale znižuje aj expresiu proteínov hrotov. Dvojitý prínos.
Zistenia
Transfekcia hrotov v bunkách HEK293-ACE2+ spôsobila tvorbu syncýtií, bunkové odlupovanie a fokálnu denudáciu bunkovej monovrstvy; transfekcia v bunkách Vero E6 tiež spôsobila tvorbu syncýtií. Expresia hrotu zvýšila reguláciu potenciálne nefrotoxických génov (TNF-α, MCP-1 a ICAM1). Spike reguloval cytoprotektívny gén HO-1 a príslušné signálne dráhy (p-Akt, p-STAT3 a p-p38). Quercetin, induktor HO-1, znížil tvorbu syncýtií a expresiu proteínu hrotu.
Interpretácia
Hlavné závery štúdie sú nasledovné: 1) expresia proteínu hrotov v obličkových bunkách poskytuje relevantný model na štúdium maladaptívnych a adaptívnych reakcií, ktoré sú dôležité pre AKI pri COVID-19; 2) takáto expresia proteínu hrotov reguluje HO-1; a 3) kvercetín, induktor HO-1, môže poskytnúť klinicky relevantnú /realizovateľnú ochrannú stratégiu pri AKI, ku ktorému dochádza pri COVID-19.
Proteín hrotu vírusu SARS-CoV-2 indukuje hem oxygenázu-1: Patofyziologické dôsledky
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8669938/
KURKUMÍN
Vplyv vybraných polyfenolov na fúziu do ľudských buniek A549 s nadmernou expresiou receptora ACE2. (A) Fúzia buniek A549 exprimujúcich proteín eGFP spike s bunkami A549 stabilne exprimujúcimi ľudský receptor ACE2. Stupnica označuje 250 μm. (B) Kvantitatívna analýza vytvorených syncytií. Experimenty sa robili v troch opakovaniach a opakovali sa trikrát. Údaje sú uvedené ako % kontroly ± SD; TF-3 – teaflavín-3,3'-digalát Δ p≤0,01, * p≤0,001. Kontrola – 0,025% DMSO, pozitívna kontrola – 20 μg/ml protilátky protiACE2.
V štúdii z júna 2021 sa zistilo, že spomedzi testovaných polyfenolov mal kurkumín najväčší účinok pri prevencii tvorby syncytií.
Aj v našom ďalšom experimente, v ktorom boli bunky A549 exprimujúce pseudotypové virióny SARS-CoV-2 s hrotovým proteínom vopred inkubované s testovanými polyfenolmi a potom sa 4 h vrstvili na hCE2/A549, bunky vykazovali výrazne zníženú väzbu. Inkubácia s brazílínom v koncentrácii 25 μg/ml znížila prichytenie o 40%, s TF-3 v koncentrácii 10–25 μg/ml o 40% až 70% a s kurkumínom v rovnakých koncentráciách, t.j. 10–25 μg/ml, o 70% až 95%. Výsledky boli v súlade s predtým získanými súbormi údajov.
Fenolové zlúčeniny narúšajú väzbu hrotov na receptory a vstup pseudovírusov SARS-CoV-2
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8211150/
Potrebujeme ďalšie štúdie na určenie najlepšieho postupu pri používaní zlúčenín, ako sú quercetín a kurkumín, pri liečbe patologických stavov súvisiacich so spike proteínmi.
Chcel by som poďakovať Joachimovi Gerlachovi a tímu vedicinals.com za ich príspevok k výskumu tohto príspevku. Vedicinals ma oslovili, pretože zistili, že moje odporúčania na liečbu sa veľmi zhodujú s ich vlastnými zisteniami. Majú liečebný postup, ktorý sa môže ukázať ako samotný virtuálny protokol. Nazýva sa Vedicinals9.